Como detectar el virus del papiloma humano

Cómo protegerse del virus del papiloma humano VPH

La metodología CLART® Human Papillomavirus 2 Genomica, Madrid, España, utiliza cebadores biotinilados que amplifican un fragmento de 450 pb dentro de la región L1 del VPH. La co-amplificación de una región de 892 pb del gen FTR y un fragmento de 1. 202 pb de un plásmido transformado proporciona un control para asegurar la adecuación de la extracción de ADN y la eficiencia de la PCR. Los amplicones se detectan por hibridación en un microarray de baja densidad que contiene sondas de ADN triplicadas específicas para 35 VPH -6, -11, -16, -18, -26, -31, -33, -35, -39, -40, -42, -43, -44, -45, -51, -52, -53, -54, -56, -58, -59, -61, -62, -66, -68, -70, -71, -72, -73, -81, -82, -83, -84, -85 y -89. Se pueden obtener resultados semicuantitativos en un lector automático con resultados altamente comparables, mostrando una excelente sensibilidad, especificidad y reproducibilidad [31].

Este ensayo genotipa los 14 VPH que están cubiertos por Real-Time [44]. INNO-LiPA LiPA HBV GT; Innogenetics N. V. , Gante, Bélgica se basa en la co-amplificación de la región de 65 pb del gen L1 del VPH y los 270 pb del gen HLA-DP1 humano utilizando cebadores biotinilados SPF10, seguido de la genotipificación [53,54]. Algunos genotipos cancerígenos como el VPH-35, -39, -52, -56 y -66 no fueron cubiertos por este método, y se encontró que era el genotipo menos eficaz para el VPH-42 y -59 [33].

Aunque la mayoría de los métodos de amplificación de ácidos nucleicos pueden detectar de forma fiable el VPH en muestras de frotis cervical, sólo unos pocos, incluyendo la PCR en tiempo real, son potencialmente adecuados para muestras clínicas de archivo, ya que se dirigen a una porción relativamente pequeña del genoma del VPH inferior a 160 pb. Por lo tanto, las diferencias observadas en la eficacia de amplificación del control interno entre Real-Time e INNO-LiPA pueden atribuirse de forma más razonable a las diferencias en la longitud del amplicón objetivo: 136 pb frente a 270 pb, respectivamente [44]. Este kit también puede utilizarse en muestras tomadas con hisopos, cepillos, tampones y lavados [55,56].

La metodología CLART® Human Papillomavirus 2 Genomica, Madrid, España, utiliza cebadores biotinilados que amplifican un fragmento de 450 pb dentro de la región L1 del VPH. La co-amplificación de una región de 892 pb del gen FTR y un fragmento de 1. 202 pb de un plásmido transformado proporciona un control para asegurar la adecuación de la extracción de ADN y la eficiencia de la PCR. Los amplicones se detectan por hibridación en un microarray de baja densidad que contiene sondas de ADN triplicadas específicas para 35 VPH -6, -11, -16, -18, -26, -31, -33, -35, -39, -40, -42, -43, -44, -45, -51, -52, -53, -54, -56, -58, -59, -61, -62, -66, -68, -70, -71, -72, -73, -81, -82, -83, -84, -85 y -89. Se pueden obtener resultados semicuantitativos en un lector automático con resultados altamente comparables, mostrando una excelente sensibilidad, especificidad y reproducibilidad [31].

La infección por el virus del papiloma humano VPH es uno de los principales agentes causales del cáncer de cuello uterino en las mujeres1. En 2018, aproximadamente 311. 000 mujeres murieron de cáncer de cuello uterino y más del 85% de estas muertes se produjeron en países de ingresos bajos y medios2.

Los tipos de VPH se pueden clasificar en alto riesgo HR y bajo riesgo LR. Se sabe que los tipos HR, por ejemplo, los tipos 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, están estrechamente relacionados con lesiones preneoplásicas y carcinomas, mientras que los tipos LR, por ejemplo, los tipos 6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81, tienden a causar verrugas3. La detección precoz de los VPH-AR mediante un método sencillo y rápido es extremadamente importante para la acción terapéutica contra el cáncer de cuello de útero, especialmente en zonas donde no se dispone de equipos especializados4. La infección por el virus del papiloma humano VPH es la principal causa de los cánceres cervicales y de las neoplasias intraepiteliales cervicales NIC en todo el mundo.

En consecuencia, sería útil evaluar las pruebas del VPH para detectar el cáncer de cuello uterino. Recientemente desarrollada, la prueba Hybrid Capture HCA II de segunda generación es un ensayo de hibridación líquida no radiactivo, relativamente rápido, diseñado para detectar 18 tipos de VPH, divididos en grupos de alto y bajo riesgo. Se evaluó a 1055 mujeres para detectar la infección por VPH con la prueba HCA II. Quinientas diez, el 48,3% de estas mujeres estaban infectadas por el VPH; 60, el 11,8% tenían ADN de VPH de bajo riesgo de cáncer; 269, el 52,7% tenían tipos de VPH de alto riesgo y 181, el 35,5% tenían ambos grupos.

Por lo tanto, 450 mujeres, el 88,2% de este grupo infectado por el VPH, tenían al menos un tipo de VPH de alto riesgo y, por lo tanto, se consideraron de alto riesgo de cáncer. Entre el grupo con resultados de la prueba de Papanicolaou, la prevalencia global del ADN del VPH fue del 58,4%. Se detectaron diferencias significativas en la infección por el VPH del cuello uterino entre los frotis normales de Papanicolaou I y los carcinomas de Papanicolaou IV p<0,0001.

Los valores de la carga viral del VPH obtenidos para los Pap I y los SIL fueron significativamente diferentes, con una tendencia al alza p<0,0001, lo que sugiere una correlación positiva entre los valores altos de carga viral y el riesgo de SIL. Debido a los elevados costes de la prueba HCA II, su uso para el cribado masivo cervical de rutina no puede recomendarse en los países pobresSin embargo, es una herramienta útil cuando se combina con la citología, diagnosticando infecciones de alto riesgo en casos aparentemente no